表面等离子技术(Surface Plasmon Resonance, SPR )能够对分子相互作用的动态过程进行实时监控。分析过程无需对分子进行标记或者修饰,就能获得原位状态下的分子结合活性数据。基于SPR技术的Biacore提供了分子相互作用的亲和力、动力学和特异性等多种信息,也可以精确测定生物分子的活性浓度。
相互作用的一个分子通过共价键或者非共价键固定在传感芯片表面上,而另一个分子以溶液的形式流经传感芯片表面。由于分子间相互作用而引起的芯片表面质量变化就可以通过 SPR 技术实时地记录下来用于分析。记录的实时结合信号称为传感图,响应值(纵轴)的单位称为共振单位(RU)。
1. 发现相互作用(有无结合):生物分子间究竟是否发生相互作用 ? 结合位点数是多少 ?
2. 结合动力学:分子间相互作用的快慢 ( 结合和解离速率 )? 动力学分析也能获得关于相互作用强弱(亲和力)的信息。
3. 生物分子结构 - 功能关系:为什么结合能够发生:结合的驱动力是什么(热力学信息)以及相互作用的强弱 ( 亲和力 )?认识分子间相互
作用的结构基础:哪些分子结构单位是相互作用必须的 ? 结合过程中是否涉及必要的分子构象改变 ?
4. 亲合力筛选:通过现有技术,能够在更宽的亲和力范围内研究药物 - 靶标间的相互作用,最终发现有价值的化合物。既可以采用直接结合
的方式对大批量候选物进行快速筛选,也可以基于动力学信息对抗体候选物或先导化合物进行精细地表征与区分。
传统上有多种生物化学和生物物理手段可以进行生物分子相互作用分析,但所获得的分子互作信息往往非常有限。相比之下,表面等离子体共振技术(SPR)非标记分析技术能够提供多角度、高可信的分子互作信息。
SPR作为中国、美国药典收录技术,对药物-靶点结合亲和力和动力学进行表征,用于新药的临床和上市申报。
1. 单抗, 双抗,ADC,Fab
2. 多肽药物
3. 小分子,化合物片段
4. 中草药活性组分
5. 核酸-蛋白相互作用分析
6. SPR-MS分子垂钓
7. 填料配基蛋白
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