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SPR-MS分子垂钓

细胞信号通路中未知结合因子的发现、药物新靶点发现和中草药中有效组分的鉴定一直是生命科学和药物开发最前沿的课题。在细胞间信号传导，细胞内信号通路研究中，经常需要寻找与已知关键蛋白相互作用的未知因子（蛋白、核酸、多糖等），从而发现整个信号通路。在中草药、功能食品研究中，最核心的就是通过已知药物靶点直接发现复方中有效的单体组分。

       基于SPR-MS的垂钓技术能够从组织、细胞、中药提取物、植物等混合样品中快速发现和鉴定新的互作因子。通过将诱饵分子(bait)固定在芯片表面，当混合物流经时，未知的互作因子与诱饵分子相结合并被捕获。Biacore T200模块能够自动回收这些互作因子，并结合质谱技术鉴定出未知因子序列和结构。相比其他传统垂钓技术，SPR-MS具有灵敏度高（能够捕获许多Co-IP无法发现的瞬时结合对象和小分子）、特异性高（非蛋白基质，流动体系+双参比减少非特异性蛋白干扰）和无需制备抗体，无需构建GST载体的优势。

       百奥克提供从SPR捕获到质谱鉴定全流程的SPR-MS检测服务，已帮助多位科学家快速、高灵敏、高特异性地发现并鉴定未知结合对象或活性组分，取得课题突破。

SPR-MS分子垂钓应用领域

1.  信号传导、基因调控中相互作用因子的发现
2.  血清中和抗体的快速筛选
3.  受体蛋白结合配体的发现
4.  病毒蛋白、激素、信号分子膜上结合位点的发现
5.  核酸序列转录因子的发现
6.  中草药活性成分的分离鉴定
7.  中草药药效靶点的发现与确认

SPR-MS分子垂钓检测流程

参考文献

1. Cao Y, Li YH, Lv DY, Chen XF, Chen LD, Zhu ZY, Chai YF, Zhang JP. Identification of a ligand for tumor necrosis factor receptor from Chinese            herbs by combination of surface plasmon resonance biosensor and UPLC-MS. Anal Bioanal Chem.2016 Jul;408(19):5359-67.
       2. Pang Y, Gou M, Yang K, Lu J, Han Y, Teng H, Li C, Wang H, Liu C, Zhang K, Yang Y, Li Q. Crystal structure of a cytocidal protein from lamprey            and its mechanism of action in the selective killing of cancer cells. Cell Commun Signal. 2019 May 27;17(1):54.
       3. Fu R, Yang P, Li Z, Liu W, Amin S, Li Z. Avenanthramide A triggers potent ROS-mediated anti-tumor effects in colorectal cancer by directly            targeting DDX3. Cell Death Dis. 2019 Aug 7;10(8):593. doi: 10.1038/s41419-019-1825-5. PMID:31391454; PMCID: PMC6685981.4. Ji D, Cui            X, Qin G, Chen T, Tian S. SlFERL Interacts with S-Adenosylmethionine Synthetase to Regulate Fruit Ripening. Plant Physiol. 2020 Dec;184            (4):2168-2181.
       4. Ji D, Cui X, Qin G, Chen T, Tian S. SlFERL Interacts with S-Adenosylmethionine Synthetase to Regulate Fruit Ripening. Plant Physiol. 2020            Dec;184(4):2168-2181.

技术服务项目

1.  SPR-MS分子垂钓实例